紧张激烈的第十届生物学实验技能大赛初赛终于结束了！想必各位选手也是等不及想要知道本次初赛的答案吧！那么我们马上来揭晓本次初赛的试题与答案！
PartⅠ实验基础（共8题）
1、在解剖青蛙的实验中，注射动脉的颜料用；注射静脉的颜料用:（D）
A.吡罗红甲基蓝B.醋酸洋红亚甲基蓝
C.苯酚品红甲基蓝D.刚果红亚甲基蓝
2、用哺乳动物红细胞制备细胞膜的方法正确的是:（A）
A.把细胞放在清水里，胀破细胞B.用针扎破细胞
C.用镊子把细胞膜剥下来D.用石英砂岩研碎细胞
3、显微镜或解剖镜的拉杆的用处是:（C）
A.调节物镜与载物台之间的距离
B.调节亮度
C.使显微镜的下观察的画面投放在电脑屏幕上
D.调节目镜瞳距
4、蛋白质含量的测定实验可以用哪两种方法？（A）
A.考马斯亮蓝法，紫外吸收法
B.考马斯亮蓝法，砷钼酸比色法
C.双缩脲法，索氏抽提法
D.紫外吸收法，索氏抽提法
5、在细菌细胞中DNA的分离与提纯实验中，提取过程中需要使用柠檬酸钠缓冲液或加EDTA的目的是什么?(D)
A.破坏细菌细胞壁
B.洗涤菌体
C.使核酸与蛋白质分开，利于提取
D.防止脱氧核糖核酸酶（DNase）对DNA的降解作用
6、DNA与RNA的定量测量分别用到以下哪两种方法？(A)
A.3,5-二羟基甲苯法与二苯胺法
B.二苯胺法与3,5-二羟基甲苯法
C.福林（Folin）-酚试剂法与索氏提取法
D.索氏提取法与福林（Folin）-酚试剂法
7、在叶绿体色素提取与分离试验中，研磨前应在研钵中加入的固体物质是什么？(B)
A.醋酸铜粉末与碳酸钙粉末B.碳酸钙粉末与石英砂
C.石英砂与硫酸铜粉末D.硫酸铜粉末与醋酸钙粉末
8、在氨基酸纸层析法试验中，在层析法展层和显色操作中，点好的滤纸应怎样放置？（C）
A.展平，原点在下端，斜放在培养皿内
B.制成圆筒，原点在上端，浸立在培养皿内
C.制成圆筒，原点在下端，浸立在培养皿内
D.展平，原点在上端，斜放在培养皿内
PartⅡ生物学基础（共22题）
1、烟草、烟草花叶病毒、噬菌体中含有的物质，下列叙述正确的是：（D）
A.核酸的种类依次是2、1、2
B.核苷酸的种类依次是8、5、4
C.五碳糖的种类依次是2、1、2
D.含N碱基的种类依次是5、4、4
2、大肠杆菌DNA复制过程中，下列哪种酶不参加该生物学过程：（C）
A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶
C.DNA连接酶D.RNA酶
3、在正常生理情况下，神经元细胞膜钠泵每一个活动周期可使：（C）
A.2个Na+移出膜外,消耗1个ATP
B.2个K+移入膜内,消耗1个ATP
C.3个Na+移出膜外,同时2个K+移入膜内,消耗1个ATP
D.2个Na+移出膜外,同时3个K+移入膜内,不消耗ATP
4、植物激素间的平衡在维持和打破芽休眠中起调控作用，其中起主要作用的是：（D）
A.IAA与GAB.CTK与GA
C.GA与EthD.ABA与GA
5、内质网是细胞中的“钙库"之一，以下描述正确的是：（B）
A.钙离子从细胞质扩散到内质网中
B.内质网上钙泵将钙离子从细胞质主动运输至内质网
C.钙离子通过内质网上的钙离子通道主动运输至内质网
D.钙离子通过钠钾泵协同转运至内质网
6、关于RNA的叙述，错误的是：（B、D）（由于审题者在审查题目时的失误，导致本题有两个正确答案，在批改过程中两个答案均可得分）
A.主要有mRNA、tRNA、rRNA三大类
B.最小的一种RNA是tRNA
C.原核生物没有hmRNA
D.原核生物有SnRNA
7、下述哪种突变最有可能致死？：（A）
A.插入或丢失一个核苷酸
B.同时丢失三个核苷酸
C.插入一个和在相邻的部位丢失一个核苷酸
D.在某部位发生碱基替换
8、蛋白质的生物合成中识别mRNA上起始密码子的是，核糖体亚基上的。（D）
A.大;70S亚基B.小;30S复合体
C.小;16SRNAD.小;28SRNA
9、当RNA合成时，RNA聚合酶沿模版链移动的方向是，RNA链合成的方向是：（B）
A.5’-3’;5’-3’B.3’-5’;5’-3’
C.3’-5’;3’-5’D.5’-3’;3’-5’
10、离子泵是一张具有ATP水解酶活性的载体蛋白，能利用水解ATP释放的能量跨膜运输离子。下列叙述正确的是：（C）
A.离子通过离子泵的跨膜运输属于协助扩散
B.离子通过离子泵的跨膜运输是顺着浓度阶梯进行的
C.动物一氧化碳中毒会降低离子泵跨膜运输离子的速率
D.加入蛋白质变性剂会提高离子泵跨膜运输离子的速率
11、当人体血糖浓度偏高时，质膜中的某种葡萄糖载体可将葡萄糖转运至肝细胞内，血糖浓度偏低时则转运方向相反。下列叙述正确的是：（C）
A.该载体在血糖浓度偏低时的转运需要消耗ATP
B.转运速率随血糖浓度升高不断增大
C.转运方向不是由该载体决定的
D.胰岛素促进葡萄糖运出肝细胞
12、精子内的顶体由溶酶体特化而来，精卵识别后，顶体膜与精子细胞膜融合，释放溶酶体酶使卵子外层形成孔洞，以利于精卵融合形成受精卵，下列叙述正确的是:（B）
A.顶体内储存的溶酶体酶是在精子的溶酶体中合成的
B.精子游向卵子所需的能量来自于线粒体和细胞质基质
C.顶体膜和精子细胞膜融合体现生物膜的选择透过性
D.受精卵中的遗传物质一半来自父方另一半来自母方
13、下列关于神经调节的叙述，错误的是：（C）
A.树突膜上可能含有神质的受体，受体具有识别功能
B.神经纤维膜内局部电流的方向与兴奋传导方向一致
C.反射弧中的突触数量越多，反射完成的越快
D.静息状态时，若神经细胞膜对Na+通透性增大，
会导致静息电位的绝对值减小
14、以下哪一项是限制糖酵解速度的一步？：（B）
A.甘油酸-3-磷酸的生成B.6-磷酸果糖的磷酸化
C.葡萄糖的磷酸化D.丙酮酸转化为乳酸
15、如果一个实验动物的食物中含有过多的脂肪且碳水化合物不足，将会出现以下哪种情况？：（D）
A.乙酰辅酶A的合成下降B.消耗过多的葡萄糖
C.将脂肪酸转换成葡萄糖D.酮病
16、初级溶酶体是在哪里产生的：（C）
A.细胞质液B.细胞核C.高尔基体D.内质网
17、赤霉素(一种植物生长激素)属于哪类物质？（E）
A.磷脂B.甘油三酯C.蜡D.固醇E.萜类
18、核糖体RNA的基因位于染色体上的位置是：（E）
A.端粒B.主隘痕C.着丝粒D.卫星DNAE.副隘痕
19、核糖体与内质网之间的联系是由什么决定的？：
（B）
A.碳水化合物B.蛋白质的氨基末端序列
C.蛋白质羧基末端的序列D.脂肪E.离子
20、微生物总生物量增加的主要限制因子是：（B）
A.缺乏O2和CO2B.温度
C.太阳能的量D.生物间相互关系
21、肌动蛋白——肌球蛋白的空间关系被用来作为肌肉组织分类的依据，根据这种分类，所有肌肉组织可以分为3类：（D）
A.纹肌、心肌、横纹肌
B.无纹肌、斜纹肌、心肌
C.无纹肌、斜纹肌、横纹肌
D.上皮一肌肉、共质肌、心肌
E.体位肌、相变、副肌球蛋白
22、鸭在凫水后有梳理羽毛的行为，但在求偶时，这种行为与清洁身体无关，具特殊含义。下列哪种梳理羽毛求偶的方式最高等：（D）
A.翘鼻鸭用力梳理翼上的羽干
B.绿炎鸭举翅露出鲜明的羽毛
C.绿翅鸭对翼上鲜艳部位稍作整理
D.鸳鸯象征性碰一下翼上一根大的羽毛
PartⅢ双选题
1、在蛋白质的沉淀反应实验中，可以使蛋白质沉淀的物质种类有：（AD）
A.乙醇B.酸溶液C.硫酸铵溶液D.生物碱试剂
2、向鱼鳔内注入30%的蔗糖溶液，扎进入口并称重，然后将其浸入5%的蔗糖溶液中，每隔半小时称一次重量，下列关于其重量变化的解释正确的是：（AC）
A.在进行试验的1小时内，鱼鳔重量增加是因为外界蔗糖分子进入鱼鳔
B.在进行试验的1小时内，鱼鳔重量增加是因为外界水分进入鱼鳔内
C.在进行试验的1小时后，鱼鳔重量不再增加是因为进出鱼鳔的水分子处于相对平衡状态
D.在进行试验的1小时后，鱼鳔重量不再增加是因为进出鱼鳔的蔗糖分子处于相对平衡状态
3、有苯丙氨酸羟化酶基因突变引起的苯丙铜尿毒症是常染色体隐性遗传病，我国部分地市对新生儿进行免费筛查并为患儿提供低苯丙氨酸奶粉，下列叙说正确的是：（A）（由于审题者在审查题目时的失误，导致本题只有一个正确答案，只要选择A者均有1分）
A.检测出携带者是预防该病的关键
B.在某群体中发病率为1/，则携带者的频率约为1/
C.通过染色体检查及系谱图分析，可明确诊断携带者和新生儿患者
D.减少苯丙氨酸摄入克改善新生儿患者症状，说明环境能决定表现型
4、下列关于基因工程技术的叙述，错误的是：（AB）
A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
C.载体质粒可以采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因
D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
5、在“绿叶在光下制造淀粉”的实验中，把叶片放入盛有酒精的小烧杯中，且要隔水加热。这样做主要是因为：（BC）
A.脱色的速度快，效果好
B.叶绿素易溶于酒精而难溶于水
C.酒精容易燃烧，为了保证安全，必须隔水加热
D.酒精不会分解光合作用产生的淀粉
6、用普通光学显微镜观察切片时，当用低倍物镜看清楚后，转换成高倍物镜后却看不到或看不清原来观察到的物体，导致产生该现象的原因是：（AD）
A.物体不在视野中央B.未对光C.未换目镜
D.低倍物镜和高倍物镜的焦点不在同一平面
7、相同质量的脂肪氧化，释放的能量是葡萄糖的两倍以上。脂肪被作为动物体的能量储备是因为：（AB）
A.还原态B.强疏水性
C.在自然界含量丰富D.易于消化
8、以下维生素中属于水溶性维生素的是：（BD）
A.维生素DB.维生素C
C.维生素KD.维生素B12
9、关于呼吸链的叙述下列正确的是：（CD）
A.全部存在于线粒体
B.参与呼吸链中氧化还原酶属需氧脱氢酶
C.NAD+是递氢体
D.NAD+是递电子体
E.细胞色素是递电子体
10、在分子克隆中，未知目的基因的碱基序列的情况下，目的基因可来自：（BC）
A.化学合成B.cDNA文库
C.PCR扩增D.DNA结合蛋白
PartⅣ填空题
1、在福林（Folin）-酚试剂法测定蛋白质浓度实验中，（Folin）-酚B试剂在酸性条件下较稳定，而（Folin）-酚A试剂在碱性条件与蛋白质作用生成碱性的铜-蛋白质溶液。
2、大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为16%，如测得1克样品含氮量为10mg则蛋白质含量为6.25%
3、mRNA在细胞内的种类多（多/少），但只占RNA总量的5%，它是以DNA为模板合成的，又是蛋白质合成的模板。
4、DNA序列测定的基本原理有化学降解法和酶法（双脱氧链终止法）/sanger法/桑格法两种，自动化序列分析仪是根据酶法（双脱氧链终止法）/sanger法/桑格法设计出来的。
PartⅤ问答题
1、用考马斯亮蓝法（G）测定蛋白质含量的实验原理是什么？又有什么优缺点？
答：考马斯亮蓝染料与蛋白质结合后会变为蓝色。(2分）其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。（2分）试剂配制简单，操作简便，反应灵敏，结合物非常稳定。（每个2分）不适用于小分子碱性多肽的定量。（3分）（其他答案酌情给分）
2、简述Southern印迹杂交的大致操作步骤
答：①制备待测核酸样品②琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品③预处理电泳凝胶④转膜（将凝胶中的单链DNA片段转移到固相支持物上）⑤预杂交⑥加入标记的探针DNA进行杂交⑦洗膜⑧放射自显影检测（①-⑦每点2分，⑧点1分）
PartⅥ附加题
1、请简述肌肉收缩的滑动机制的过程。（10分）
答：①ATP与肌球蛋白结合，导致肌球蛋白与肌动蛋白分离。②ATP水解，肌球蛋白获能，翘起并发生位移。③钙离子与肌钙蛋白结合，释放肌球蛋白活性位点。④Pi释放，肌球蛋白头部与下一个肌动蛋白位点结合。⑤肌球蛋白失去ADP，恢复原始状态。（各2分）
2、现有两种氨基酸H3N+-CHR1-COO-和H3N+-CHR2-COO-，请简单设计一个实验让两种氨基酸在液相中合成双肽。（9分）
答：①保护氨基酸的自由氨基（可使用苄氧甲酰基、三苯甲基、叔丁氧甲酰基、对甲苯磺酰基等）（2分）②保护氨基酸的自由羧基（盐类：钾盐、钠盐、三乙胺盐、三丁胺盐；酯：甲酯、乙酯、苄酯、叔丁酯）（2分）③（i）叠氮法
（写出一条给2分，两条3分，三条4分)(ii)活化酯法
（Ph为苯环，4分)(iii)混合酸酐法(一条2分，两条4分)
④脱去保护基（1分）
本题的重点在于有没有保护氨基和羧基的意识。如果有保护氨基与羧基的意识，我们将酌情给分。
3、三羧酸循环作为生物体内重要的代谢途径，必定受到生物体精确的调控。请写出四种常见的调节三羧酸循环的酶/酶系。（6分）
丙酮酸脱氢酶系、柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶系（各1.5分）
感谢大家对本次生物学实验技能大赛初赛的
