(哈尔滨科学技术大学)

摘要：通过不同浓度硫酸铜和混合氨基酸铜络合物对病菌细胞膜通透性及马铃薯淀粉酶、大豆脲酶作用后的活性测定，阐明了混合氨基酸铜络合物的杀菌作用机理。在混合氨基酸铜络合物中，起杀菌作用的主要是铜离子，氨基酸可以增加铜离子对植物病菌细胞膜的通透性。而杀菌作用的方式是干扰含巯基酶的活性。

关键词:混合氨基酸铜络合物，通透性，酶

1引言

通过对混合氨基酸铜络合物杀菌活性的测定和研究确认了起主要杀菌作用的成分是谷氨酸铜、甘氨酸铜、丙氨酸铜和苏氨酸铜。本文针对这种新型杀菌剂的杀灭病原菌的机理进行了研究。

2病菌细胞膜通透性的测定

2.1供试菌种

小麦白粉病病原菌一由中国农科院植保所提供;

水稻稻瘟病病原菌一由中国农科院原子能所提供，

小麦根腐病病原菌一由黑龙江省农科院植保所提供;

黄瓜枯萎病病原菌一由黑龙江省农科院园艺研究所提供。

2.2实验方法

培养30天的稻瘟病病原菌和小麦根腐病病原菌孢子用无菌水洗下，配成孢子/ml的悬浮液;将培养两周的白粉病病原菌孢子轻轻弹入烧杯中，用无菌水配成孢子/ml的悬浮液。将各种悬浮液分为三等份，其中一份加入混合氨基酸铜络合物，使其浓度达到10-3mol/L(以铜计算);另一份加入硫酸铜，使其浓度达到10-3mol/L;第三份作为对照。前两份在27℃下培养16h，离心分离，除去上清液，用0.1mol/L盐酸洗涤两次，再用无菌水洗涤两次。在电炉上慢慢烘干，再提高温度烧至白炽，保持温度30min，待试管中孢子变成白色粉末时，取出冷却，用3ml、6mol/L的HAC溶出Cu2+，用PAN做显色剂，比色测定其中含铜量。第三份空白液同时进行如上操作，所得结果见图1。

用上述方法测得谷氨酸铜、天冬氨酸铜、甘氨酸铜、丙氨酸铜、丝氨酸铜和苏氨酸铜对黄瓜枯萎病病原菌细胞膜的通透性，结果见图2。

2.3结果分析

实验结果表明，混合氨基酸络合铜透过植物病原菌细胞膜，并在其内部积累的能力远远大于硫酸铜，说明被氨基酸络合的铜离子更容易进入细胞内部。铜在病菌细胞内的积累与氨基酸铜络合物的毒力相关，即起杀菌作用的是细胞内部积累的那部分铜。

3混合氨基酸铜络合物对某些酶活性的抑制作用

3.1对淀粉酶活性的影响

取10g马铃薯，加0.2mol/L的磷酸缓冲液10ml，用研钵研碎，再25ml磷酸缓冲液冲洗，转入ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。各取50ml上述稀释液置于4个ml的容量瓶中，其中一个在电炉上加热至沸(破坏淀粉酶);另一个加入一定浓度的硫酸铜溶液;第三个加入一定浓度的混合氨基酸铜络合物。第四个原样做为全酶样本。在每一容量瓶中加入2%的淀粉溶液20ml,40℃下培养2h。2h后，在每一容量瓶中加入浓度为8%的草酸溶液8ml，在水溶上煮沸15min，冷却后中和至中性，用蒸馏水稀释至刻度.取10ml上述稀释液，加入10ml碱性铜溶液，再煮沸15min，冷却，分别加入5ml草酸——硫酸混合液，然后用。2mol/L硫代硫酸钠滴定。用消耗的硫代硫酸钠的量计算酶反应生成的还原糖的量。以先煮沸过的样本的酶活性为0，没做任何处理的样本的酶活性为1，求出加入各种浓度药剂的样本的相对活性。结果见表1。

3.2对大豆脲酶活性的影响

取0.2g大豆种子用蒸馏水浸泡16h，加入3ml,pH值为7的磷酸缓冲液，在研钵中研碎。转入ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。各取10ml上述稀释液分别置于4支试管中，其中一支加入2ml、浓度为4%的磷钨酸,另一支加入一定浓度的硫酸铜溶液，第三支加入一定浓度的混合氨基酸铜络合物，第四支保持原样作为全酶样本。向四支试管中分别加入2ml、浓度为5%尿素溶液，混匀。用秒表计算时间，在室温下停放5min。5min后加入2ml、浓度为4%的磷钨酸溶液，将上层清液转入干燥试管中。为测定所形成的氨态氮量，取1ml上清液置于试管中，用蒸馏水稀释至10ml，加入0.5ml正丁醇，搅动使其溶解，然后加入2ml浓度为4%的麝香草酚，再加入3ml次溴酸钠，混匀，静置10min，然后加入3ml正丁醇，搅拌。静置10-15min，使其分层。用移液管将上层醇溶液全部吸入一个10ml量简中，用正丁醇稀释至5ml，用1cm比色池在nm波长下测定其光密度，并在事先做好的工作曲线上求得其氨态氮含量。以先加磷钨酸沉淀酶蛋白的样本的酶活性为0，以未加任何试剂的样本的酶活性为1，求出各实验样本的相对酶活性(结果见表2)。

3.3实验结果分析

淀粉酶的活性中心主要是由氨基组成，而脲酶的活性中心是由几十个巯基组成的。从表1表2中的数据可以看到，混合氨基酸铜络合物对这两种酶的抑制作用是不同的。10-5mol/L的混合氨基酸铜络合物可使脲酶完全失活，而10-4mol/L的相同药液对淀粉酶却无抑制作用，这是因为巯基与铜的结合力大于氨基酸铜络合物，所以巯基的存在加剧了氨基酸铜络合物的解离，同时使巯基失去它原来在酶中所起的作用。而胺基与铜的结合力与氨基酸铜络合物大体相当，所以它使氨基酸铜络合物解离的作用要小得多，因而它本身受到的毒害也小些。

4结论

综上所述，在混合氨基酸铜络合物中起杀菌作用的主要是铜离子。氨基酸的作用是增加铜离子通过植物病菌细胞膜的能力。其杀菌作用的方式是进入植物病菌细胞内部的铜离子毒害含巯基的酶，使由这些酶控制的生化活动终止而杀死病菌。

参考文献（略）

往期经典

——————————————

山东省首批防治特色小宗作物病虫草害登记农药推荐名录（植保专题）

农业生产数据库查询与使用之——农药查询（讲座专题）

果蔬农药残留降解方法研究进展(农业科普帖)

动物微生物源生物农药种类及防治对象初探(植保专题)

生物农药评述（生物防治专题）

γ-聚谷氨酸在食品中的功能性研究进展（聚谷氨酸专题）

聚谷氨酸抑制盐溶液中钙质磷酸盐沉淀机理（聚谷氨酸专题）

聚谷氨酸生物的合成及其在修复和改良土壤中的应用(聚谷氨酸专题)

聚谷氨酸测定方法准确性商榷(聚谷氨酸专题)

γ－聚谷氨酸的研究及应用进展（肥料专题）

γ-聚谷氨酸的微生物合成及其在农业生产中的应用（肥料专题）

烟台地区苹果主要病虫害综合防控技术指导方案（苹果专题）

苹果树需肥规律及施肥技术（苹果专题）

L一谷氨酸促进富士苹果花青素积累的效应(肥料专题)

固原地区苹果栽培技术（苹果专题）

赣南百香果高产栽培技术（百香果专题）

三年芒果树整形修剪技术（芒果专题）

菱果牌系列肥料在南方百香果上的施肥方案及绿色植保方案（百香果专题）

莲雾研究进展（莲雾专题）

菠萝蜜栽培技术及经验浅谈(菠萝蜜专题)

海南莲雾的高产栽培技术（莲雾专题）

三亚市黄秋葵栽培技术初探（秋葵专题）

菱花集团秋葵栽培技术规程（技术普及帖）

菱花集团汶上农场公斤秋葵种子大酬宾（产品推广贴）

L一谷氨酸促进富士苹果花青素积累的效应(肥料专题)

不同修剪强度对杨桃产果期调节的影响(杨桃专题)

海南香蕉高产栽培技术要点（香蕉专题）

原生蔬菜“天绿香”高产栽培技术（野菜专题）

海南5种优质野生蔬菜种质资源介绍(野菜专题)

菱果牌系列肥料在南方火龙果上的施肥方案(肥料专题)

叶面喷施氨基酸对茶叶中γ-氨基丁酸含量的影响(肥料专题)

GB∕T37-肥料中植物生长调节剂的测定高效液相色谱法(肥料专题)

逆境胁迫下作物中γ一氨基丁酸代谢及作用的研究进展(生物刺激素专题)

生物刺激素及其在功能水溶性肥料中应用前景分析（肥料专题）

欧洲生物刺激素产业的崛起对中国的启发(生物刺激素专题)

我国生物刺激素产业发展现状及趋势（生物刺激素专题）

生物刺激素行业发展概述（生物刺激素专题）

我国多功能肥料的发展概况(肥料专题)

专业知识（培训专题）

产品介绍（培训专题）

业务拓展（培训专题）

农业生产数据库查询与使用之——农产品认证查询（讲座专题）

农业生产数据库查询与使用之——品种查询（讲座专题）

农业生产数据库查询与使用之——肥料查询（讲座专题）

农业生产数据库查询与使用之——农药查询（讲座专题）

菱果牌系列肥料在南方火龙果上的施肥方案(肥料专题)

L一谷氨酸促进富士苹果花青素积累的效应(肥料专题)

“菱果牌”有机肥宣传册（产品宣传帖）

菱果牌系列功能型冲施肥新品首发（产品推广帖）

“菱果牌”生物有机肥产品介绍（产品推广帖）

菱花牌硫酸铵在农业上的应用价值（产品宣传帖）

氨基酸植物营养液的利用价值（农业科普帖）

菱果牌系列氨基酸有机肥应用解析（肥料专题）

菱果牌生物有机肥特点剖析(肥料专题)

氨基酸组分在传统农业中的应用真相（讲座专题）

氨基酸肥料减肥增效基本原理(肥料专题)

麸酸型有机复混肥对铁观音茶叶产量与品质的影响(肥料专题)

茶树的平衡施肥(茶树专题)

田间条件下不同园龄茶树氮、磷、钾养分需求规律的研究(肥料专题)

茶树磷素营养的研究概况与发展趋向（茶树专题）

茶树对氮肥的吸收和利用（肥料专题）

几种微量元素对茶树生理及茶叶品质的影响（肥料专题）

叶面喷施氨基酸对茶叶中γ-氨基丁酸含量的影响(肥料专题)

氨基酸叶面肥对沙糖橘缺素黄化的矫治（肥料专题）

氨基酸液肥在蔬菜生产上的应用效果(肥料专题)

生物刺激素及其在功能水溶性肥料中应用前景分析(肥料专题)

海南经济作物用肥方案对比之一（肥料专题）

菱果牌系列肥料在北方金银花上的施肥方案(肥料专题)

氨基酸叶面肥对沙糖橘缺素黄化的矫治（肥料专题）

氨基酸肥对烤烟减肥增效的作用(肥料专题)

中田大山楂施肥解决方案(肥料专题)

菱果牌系列肥在大拱棚西瓜栽培上的提质增效初报（肥料专题）

菱果牌系列肥料在华北地区蓝莓上的施用方案（蓝莓专题）

几种中草药栽培用肥方案（讲座专题）

宁夏枸杞优质高产施肥方案（肥料专题）

菱花绿色韭菜肥料解决方案（肥料专题）

黄淮海地区大豆高产(斤)解决方案(专题讲座)

菱花小麦种植技术解决方案

柑橘养分需求基本规律（柑橘产业）

鲁西南地区绿色土豆栽培技术(土豆产业)

菱花绿色芹菜秋冬栽培技术（芹菜产业）

菱花集团任城农场水稻管理关键节点控制集成（水稻专题）

汶上农场6种主要杂粮栽培技术要点（栽培专题）

氨基酸肥对烤烟减肥增效的作用(肥料专题)

味精废浆有机肥对西瓜根系特性与根际土壤腐殖质组成的影响(肥料专题)

氨基酸液体肥料对沙糖桔产量及品质的影响(肥料专题)

叶面喷施氨基酸对茶叶中γ-氨基丁酸含量的影响(肥料专题)

土壤碳水化合物、氨基酸、木质素特性及其颗粒稳定性研究进展（土壤专题）

土壤生物退化及其修复技术研究进展（土壤专题）

施用有机肥对土壤生物性状影响的研究进展(土壤专题)

土壤有机质对土壤肥力与作物生产力的影响（土壤专题）

不同用量葡萄糖对土壤氮素转化的影响(土壤专题)

添加葡萄糖及硫酸铵对水稻土微生物生物量和功能多样性的影响(土壤专题)

不同土壤有机氮的化学组分及其有效性的研究（土壤专题）

植物吸收土壤有机氮的研究进展（土壤专题）

土壤微生物在促进植物生长方面的作用(土壤专题)

土壤有机质及其研究方法综述(土壤专题)

有机农业和土壤生物多样性(土壤专题)

根系分泌物与根际微生物相互作用研究综述（土壤专题）

土壤活性有机质及其与土壤质量的关系(土壤专题)

有机肥施用对土壤肥力影响的研究进展（肥料专题）

年终了，总结下菱花肥业菱果牌氨基酸肥料的效果之三（肥料专题）

年终了，总结下菱花肥业菱果牌氨基酸肥料的效果之一（肥料专题）

年终了，总结下菱花肥业菱果牌氨基酸肥料的效果之二（肥料专题）

氮的同化与吸收示意图（农业科普帖）

植物吸收土壤有机氮的研究进展（土壤专题）

不同微生物对形成不同腐殖质组分的差异性研究进展(肥料专题)

氨基酸氮在农业生态系统中的重要作用(氨基酸专题)

氨基酸肥在农业上的应用效果(农业科普帖)

氨基酸对植物的作用（技术科普帖）

不同土壤有机氮的化学组分及其有效性的研究（土壤专题）

氨基酸与营养健康（氨基酸专题）

施用化肥对农业生态环境的负面影响及对策（肥料专题）

化学肥料的土壤生态环境效应(肥料专题)

氮素化肥的污染现状与防治对策(肥料专题)

化肥污染及其防治(肥料专题)

我国化肥产业氮磷污染及防治对策（肥料专题）

各种有机肥原料的弊端与优势评价

味精废液对花生产量、品质和土壤酶活性的影响（肥料专题）

关于有机肥直接种子发芽演示的勘误(肥料专题)

有机碳肥对养分平衡的作用初探——试析植物营养中的碳短板(肥料专题)

含碳肥料与碳营养的探讨研究(肥料专题)

有机农业和土壤生物多样性（有机专题）

统一腐殖酸与黄腐酸概念的再探讨(肥料专题)

根系分泌物与根际微生物相互作用研究综述（土壤专题）

土壤生物退化及其修复技术研究进展（土壤专题）

土壤中解磷、解钾微生物研究进展（肥料专题）

腐植酸类物质是土壤健康的重要保障（肥料专题）

土壤微生物在促进植物生长方面的作用(土壤专题)

生物炭对土壤肥料的作用及未来研究(肥料专题)

我国农林园艺作物土传病害发生和防治现状及对策分析（技术普及帖）

一般作物必需营养元素的主要生理作用（肥料专题）

高等植物对氨基酸态氮的吸收与利用研究进展(氨基酸专题)

植物氨基酸多元素肥料生物效应的研究进展（肥料专题）

味精废浆有机肥对西瓜根系特性与根际土壤腐殖质组成的影响(肥料专题)

γ-聚谷氨酸的微生物合成及其在农业生产中的应用（肥料专题）

氨基酸发酵尾液对水溶肥料的增效作用与机理研究(肥料专题)

腐植酸类物质与植物抗逆性研究进展（肥料专题）

土壤活性有机质及其与土壤质量的关系(土壤专题)

土壤有机质及其研究方法综述(土壤专题)

施用有机肥对土壤生物性状影响的研究进展(土壤专题)

有机肥施用对土壤肥力影响的研究进展（肥料专题）

有机肥营养元素释放的研究进展（肥料专题）

中国现代农业发展过程中的有机肥使用问题（技术普及帖）

中国有机肥料研究进展（技术普及帖）

不同有机肥分解转化特性及土壤培肥效果的研究（肥料专题）

土壤有机质对土壤肥力与作物生产力的影响（土壤专题）

施用有机肥对土壤生物性状影响的研究进展(土壤专题)

当前我国水溶肥巨头的氨基酸水溶肥登记情况（肥料专题）

我国当前的主要肥料执行标准概述（肥料专题）

当前我国水溶肥巨头的氨基酸水溶肥登记情况（肥料专题）

含腐植酸水溶肥料现状与登记管理（肥料专题）

鲁西南肥料厂登记证一览表（肥料专题）

NY-生物有机肥（肥料专题）

NY-含氨基酸水溶肥料（肥料专题）

作为现代农业的参与者，您如果每天都想接收到有用、实际、简便、易行的农业技术那就动动







































白癜风发病的机制是什么
白癜风复发怎么办